細(xì)胞株是原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,但有少數(shù)細(xì)胞可以渡過危機(jī)存括下來,這些存活的細(xì)胞又可以順利傳40一50次,而且依然保持原來的染色體數(shù)目以及接觸抑制的行為。細(xì)胞株是冷凍保存的細(xì)胞,作為細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)的細(xì)胞,主要用于研究目的。到目前為止,還沒有建立人的細(xì)胞株的事例,在研究設(shè)施中,冷凍的確立細(xì)胞株在需要時被解凍,培養(yǎng)和增殖,并用于研究。
細(xì)胞株應(yīng)用主要體現(xiàn)在以下幾個方面:
1)免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位
2)研究抗酶抗體的合成
3)顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)
4)定量檢測體液中抗原或抗體成份
細(xì)胞株的實(shí)驗(yàn)標(biāo)本采集:
(1)標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
(2)血清:使用不含熱原的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
(3)血漿:3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
(4)細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
(5)組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
(6)保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。