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胃動素(MTL)ELISA 試劑盒
競爭法可用于測定抗原,也可用于測定抗體。以測定抗原為例,受檢抗原和酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合,因此結(jié)合于固相的酶標(biāo)抗原量與受檢抗原的量呈反比。操作步驟如下:
⑴將特異抗體與固相載體連接,形成固相抗體。洗滌。
⑵待測管中加受檢標(biāo)本和一定量酶標(biāo)抗原的混合溶液,使之與固相抗體反應(yīng)。如受檢標(biāo)本中無抗原,則酶標(biāo)抗原能順利地與固相抗體結(jié)合。如受檢標(biāo)本中含有抗原,則與酶標(biāo)抗原以同樣的機(jī)會與固相抗體結(jié)合,競爭性地占去了酶標(biāo)抗原與固相載體結(jié)合的機(jī)會,使酶標(biāo)抗原與固相載體的結(jié)合量減少。參考管中只加酶標(biāo)抗原,保溫后,酶標(biāo)抗原與固相抗體的結(jié)合可達(dá)充分的量。洗滌。
⑶加底物顯色:參考管中由于結(jié)合的酶標(biāo)抗原多,故顏色深。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差,代表受檢標(biāo)本抗原的量。待測管顏色越淡,表示標(biāo)本中抗原含量越多。一般情況,是通過方波伏安法,檢測培養(yǎng)體系的峰電流,通過峰電流與抗原抗體的線性關(guān)系來終確定體系的終檢測目標(biāo)的濃度。
酶聯(lián)免疫吸附測定enzyme linked immunosorbent assay(簡寫ELISA)指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體結(jié)合專一性進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法。酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)為免疫學(xué)中的經(jīng)典實(shí)驗(yàn),本詞條從定義、基本原理、分類方法、操作要點(diǎn)等方面對其進(jìn)行了詳細(xì)介紹。
胃動素(MTL)ELISA 試劑盒
注意事項(xiàng)
1. 從2-8℃取出的試劑盒,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差
3. 建議所有標(biāo)準(zhǔn)品、樣本都做雙份檢測。
4. 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
5. 為避免交叉污染,要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。
6. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
7. 底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。
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